Tests du virus de l'hépatite B (ELISA et PCR)

L'hépatite B est une maladie infectieuse du foie qui survient par un mécanisme auto-immun. Le virus, pénétrant dans le sang, se multiplie dans les hépatocytes, provoquant leur mort. Dans sa forme chronique persistante, l'hépatite B provoque le cancer et la cirrhose. En termes de symptômes, la maladie s'apparente à un rhume, il est difficile de l'identifier à un stade précoce. Après un contact avec un patient ou une visite dans des pays à forte incidence, la menace d'une infection potentielle, des tests sanguins sont effectués. L'analyse PCR pour l'hépatite B avec une grande précision détermine la présence du virus, le degré d'activité de l'agent pathogène.

Une évaluation qualitative identifie l'agent pathogène, une évaluation quantitative aide à établir le degré de charge virale. Le réexamen aide à voir le tableau clinique de l'évolution de la maladie en dynamique.

Que vais-je découvrir? Le contenu de l'article.

Qu'est-ce que la PCR pour l'hépatite B?

La méthode de réaction par polymérase (PCR) a été développée par le lauréat du prix Nobel Mullis. Il est basé sur le principe de la copie de la structure de l'agent pathogène. Détermine l'ADN du virus HBV et sa concentration dans le sang. Pendant la période de morbidité, un antigène protéique est présent dans le sérum - une partie de la coquille de l'agent pathogène. C'est lui qui reconnaît et attaque le système immunitaire du corps..

Par la concentration d'antigènes et d'anticorps dans le sérum sanguin, on peut juger du degré d'activité de l'agent pathogène.

La PCR fournit une estimation du VHB au moment de l'échantillonnage. Dans le processus de recherche moléculaire, la chaîne d'ADN est d'abord clivée; pour cela, la température dans l'amplificateur augmente d'abord, puis diminue fortement. Des marqueurs dans la séquence souhaitée sont attachés à l'ADN - des copies du matériel de test sont créées, ils déterminent la concentration de l'agent pathogène par 1 ml.

Indications pour la recherche

L'analyse PCR qualitative identifie le pathogène. Les résultats sont utilisés pour juger du stade de l'hépatite.

Des recherches sont en cours:

  • receveurs de sang de donneurs;
  • patients avec insuffisance rénale sous hémodialyse;
  • infecté par le VIH;
  • femmes enceintes;
  • le personnel médical des départements des maladies infectieuses;
  • assistants de laboratoire examinant le sang;
  • patients atteints de pathologies hépatiques;
  • tous potentiellement infectés;
  • les personnes qui ont visité des pays à forte incidence.
La PCR quantitative est réalisée:
  • si l'agent pathogène du VHB a été précédemment identifié, un traitement est effectué;
  • après des tests ELISA positifs (dosage immunoenzymatique);
  • pour les maladies du foie causées par le virus de l'hépatite B.

Pour la recherche, le sang veineux est prélevé, cela se fait à jeun. La précision de l'évaluation dépend de la bonne préparation du patient avant les examens.

Types de PCR

Les méthodes quantitatives et qualitatives de diagnostic de l'hépatite B sont essentiellement les mêmes. Ils sont basés sur les propriétés du virus à ADN, sa capacité à synthétiser des protéines spéciales qui ne sont pas dans le corps humain. La méthode de réaction par polymérase avec un degré de probabilité élevé identifie un pathogène avec une structure complexe.

En fonction de la concentration de HBsAg, HBeAg, le stade de développement de la maladie et l'exactitude du traitement sont jugés. Dans l'hépatite aiguë, ils sont présents dans le sang en même temps; en présence d'Ag HBe, le patient est porteur du virus, capable d'infecter d'autres. La technique de PCR est déterminée par le médecin en fonction de l'histoire du patient.

PCR quantitative pour l'hépatite B

Au cours de l'évolution de la maladie, la réaction en chaîne de la polymérase est analysée à plusieurs reprises, le nombre de virus dans le sang change constamment. Après la période d'incubation, le niveau d'HBsAg augmente. Ensuite, HBeAg apparaît - un antigène situé dans le noyau de l'agent pathogène. Lorsque cet antigène disparaît, des anticorps apparaissent à sa place. Cela indique la lutte du corps avec l'agent pathogène. La méthode détermine la charge virale sur le système immunitaire.

L'indicateur quantitatif de la PCR révèle le danger d'une forme chronique de la maladie. Le taux de transaminase a été établi, auquel le virus est inactif pour les autres. Pour les patients enregistrés, des recherches sont effectuées tous les trois mois. La charge virale détermine la gravité de la maladie. S'il dépasse deux fois la limite autorisée, le patient se voit prescrire un examen supplémentaire, les tactiques de traitement sont modifiées.

PCR de haute qualité

La méthode de réaction par polymérase est la plus fiable pour identifier le pathogène. Un test PCR de haute qualité pour l'hépatite B avec une grande précision établit le fait d'une infection par le virus HBV. Il confirme ou réfute le diagnostic préliminaire.

Dans 50% de l'ADN, le virus est détecté à un stade jusqu'à ce que le corps produise des anticorps. Le système immunitaire ne reconnaît pas immédiatement les protéines étrangères, elles sont détectées lorsque le virus multiplicateur quitte les hépatocytes.

En détruisant l'HBsAg et l'HBeAg, le corps détruit simultanément les hépatocytes. Cela entraîne de graves complications. Lorsque le VHB est présent dans le sang pendant plus de deux mois, l'hépatite B devient chronique. Le virus est plus facile à combattre pendant les deux premières semaines.

Décodage des résultats de la PCR pour l'hépatite B

Une personne est en bonne santé si l'agent pathogène n'est pas présent dans le sang, ou si la concentration de HBsAg est négligeable et HBeAg est complètement absent. Le résultat dans ce cas est négatif. Ce n'est que dans des cas isolés, avec un résultat négatif, qu'une maladie est détectée, cela indique une évolution rapide de la maladie ou sa nature maligne. Les anticorps produits par le système immunitaire neutralisent le virus à ADN. Mais dans ce cas, des lésions hépatiques importantes sont possibles..

Si le résultat de l'AgHBs est supérieur aux indicateurs standard et qu'il y a l'AgHBe, une analyse quantitative supplémentaire de l'hépatite B est effectuée pour déterminer dans quelle mesure l'agent pathogène est devenu actif..

Que faire si l'hépatite B est confirmée par PCR?

Il est important de protéger les êtres chers:

  • conserver séparément les articles d'hygiène personnelle qui peuvent endommager la peau et les muqueuses (brosse à dents, rasoir, fournitures de manucure);
  • utilisez une serviette individuelle;
  • isoler les plaies.

Il est utile de suivre un régime alimentaire, d'abandonner les mauvaises habitudes. Sous réserve de toutes les prescriptions du médecin, le virus se débarrasse pour toujours.

Analyse PCR qualitative pour l'hépatite C, interprétation des résultats

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Types de PCR pour l'hépatite B et interprétation des résultats

La réaction en chaîne par polymérase est un type de test sanguin qui vous permet de détecter avec précision le virus de l'hépatite B. Une caractéristique de la méthode est qu'elle est capable de montrer le VHB à un stade précoce - déjà un mois après l'infection, tandis que l'antigène spécifique d'un patient n'est détecté qu'après 2 mois... La PCR peut détecter non seulement un virus à ADN commun, mais également des souches mutantes qu'aucune autre analyse ne vous permet de voir.

Lors du décodage de la PCR pour l'hépatite B, les résultats sont comparés aux valeurs standard. Sur cette base, des conclusions sont tirées sur la présence d'une maladie (résultat positif), la concentration du virus (activité) ou l'absence de maladie (résultat négatif). Le traitement des données prend 2 semaines.

Types de PCR pour l'hépatite virale B

Il existe 2 types de diagnostics prescrits pour l'hépatite B. Une PCR de haute qualité permet de dire avec une précision de 100% s'il y a ou non du VHB dans le sang. La PCR quantitative montre l'activité du virus, c'est-à-dire combien de fragments d'ADN du VHB sont contenus dans 1 ml de sang.

PCR de haute qualité et son interprétation

Un test sanguin pour l'hépatite B par PCR ne peut révéler que la présence de fragments d'ADN. Il est prescrit lorsque le patient soupçonne une infection par le VHB ou lorsque d'autres méthodes de diagnostic, par exemple des tests sérologiques, ne donnent pas de réponse claire. Décrypter les résultats lors d'une analyse qualitative est très simple:

  • résultat négatif - pas de virus;
  • résultat positif - virus détecté.

Le but de la PCR de qualité est de confirmer ou de nier la présence du virus de l'hépatite B, ainsi que de fournir un diagnostic précoce. Si le VHB est détecté dans les 1 à 2 semaines suivant l'infection, le traitement sera aussi efficace que possible. Avec le développement actif du VHB pendant 2 mois ou plus, la maladie devient chronique et ne peut pas être complètement guérie.

Dans le cas où une PCR qualitative pour l'hépatite montre la présence d'un virus, l'étape suivante consiste à effectuer un diagnostic quantitatif.

PCR quantitative

Il ne suffit pas de savoir simplement que le patient a le VHB pour prescrire un traitement efficace ou évaluer les résultats d'un traitement en cours. Il est nécessaire de quantifier la valeur de l'ADN du virus de l'hépatite B dans 1 ml de sang, c'est-à-dire la charge virale sur le corps. Ce type de PCR pour l'hépatite B est réalisé dans les cas suivants:

  1. Avant de prescrire un traitement.
  2. Pour évaluer l'efficacité de la thérapie.
  3. Pour déterminer le développement de la résistance du virus aux médicaments pris.
  4. Pour déterminer le stade auquel la maladie est.

Le virus est mesuré en unités internationales (UI / ml) ou en nombre de copies d'ADN / ml, c'est-à-dire en nombre de fragments d'ADN par ml de sang. Le rapport entre les deux unités dépend du système de test sélectionné et varie de 2 à 7 copies / ml à 1 UI / ml. Si le système est inconnu, la valeur moyenne est utilisée pour le recalcul:

1 UI / ml = 5 copies / ml

Si une analyse quantitative est effectuée immédiatement, la norme limite pour le diagnostic de la maladie est de 75 UI / ml. Si le résultat est supérieur à cet indicateur, le diagnostic de VHB est posé, en dessous - Le VHB n'est pas détecté.

Interprétation de la PCR quantitative

Dans l'hépatite B, les valeurs suivantes de la charge virale (virémie), copies / ml, sont les normes de la PCR:

  • 10 ^ 5 copies / ml. Lorsque, avec une activité virale élevée, une augmentation du taux d'ALT est observée plus souvent 2 fois en six mois, un traitement antiviral est immédiatement prescrit.

Pour savoir comment l'ADN de l'hépatite se comportera en termes de chronicité, c'est-à-dire le passage d'une forme chronique à une forme aiguë, les résultats du diagnostic par PCR sont également utilisés:

  • ADN du VHB 2 x 10 ^ 6 copies / ml signifie que l'acquisition d'une forme chronique de la maladie est inévitable.

Préparation à l'examen

Pour déterminer la présence du VHB par PCR, un test sanguin est prélevé dans une veine. La procédure est toujours effectuée strictement à jeun et il est préférable de se rendre au laboratoire le matin, lorsque le temps de repos naturel de la nourriture est de 8 heures. Pour que les résultats de l'examen soient corrects, vous devez savoir à l'avance comment vous préparer correctement pour le voyage à la clinique. Les étapes supplémentaires sont les suivantes:

  1. Éviter les aliments gras, le tabagisme, l'alcool et le sport 12 heures avant l'intervention.
  2. Reposez-vous pendant 20 minutes immédiatement avant de donner du sang.
  3. Avant de commencer la procédure, il est nécessaire d'avertir l'infirmière des médicaments pris..

Attention! Si le diagnostic est effectué chez un enfant de moins de 5 ans, une demi-heure avant la procédure, il doit recevoir 1 verre d'eau bouillie toutes les 10 minutes..

Résumer

Aujourd'hui, le diagnostic par PCR pour détecter l'hépatite B est la méthode la plus précise. La méthode vous permet de voir les formes latentes et mutées de la maladie, d'identifier la maladie dans les premières semaines après l'infection et, en conséquence, d'effectuer un traitement efficace. Selon la situation, une PCR qualitative ou quantitative est réalisée, qui vise à détecter le VHB et à établir son activité. Pour vous faire tester, vous devez contacter un virologue, un spécialiste des maladies infectieuses ou un hépatologue.

PCR pour l'hépatite B

L'hépatite virale B est une maladie grave et dangereuse. Le danger de cette maladie réside dans les complications qui suivent ses principales manifestations. Par conséquent, il est très important de ne pas déclencher la maladie et un diagnostic rapide aidera à y parvenir..

L'hépatite B étant principalement transmise par le sang contaminé, la principale méthode de diagnostic de cette maladie est l'analyse de ce liquide biologique. En particulier, il s'agit de la réaction en chaîne par polymérase (PCR). Mais comment la PCR est-elle utilisée pour l'hépatite B? Quelle est cette analyse? Comment bien se préparer à un test PCR pour l'hépatite? Vous trouverez les réponses dans l'article.

Quelle est cette analyse?

La réaction en chaîne par polymérase est un test sanguin qui permet de déterminer la quantité et la concentration d'ADN et d'ARN du pathogène. La PCR vous permet de diagnostiquer la maladie en temps opportun, ce qui nivelle le risque de conséquences graves de la maladie. Un petit échantillon de sang veineux du patient est prélevé pour diagnostiquer l'hépatite virale B.

Les principales tâches de la PCR pour l'hépatite B sont:

  • Diagnostic des lésions hépatiques virales au stade le plus précoce de son développement;
  • Clarification du diagnostic en cas de résultats controversés d'autres tests;
  • Détection des porteurs de virus;
  • Détermination du génotype et du quasi-type du pathogène.

Les avantages de ce type de diagnostic sont un haut niveau de fiabilité et des résultats rapides. Distinguer les tests PCR quantitatifs et qualitatifs. Examinons chacun d'eux plus en détail.

PCR quantitative pour l'hépatite B

Une PCR quantitative pour l'hépatite C est réalisée pour déterminer la quantité d'ADN pathogène dans le plasma sanguin du patient. Le fragment déterminé dans ce cas devient une séquence d'ADN unique de la protéine virale structurelle.

La PCR quantitative est utilisée pour plus que simplement établir un diagnostic. Lors du traitement de l'hépatite B, ce test peut être utilisé pour établir l'efficacité du traitement de la charge virale. S'il diminue, le traitement peut être considéré comme réussi..

Le déchiffrement d'une réaction en chaîne par polymérase de haute qualité est effectué en laboratoire par des agents de santé spécialisés. Les principaux indicateurs d'analyse sont présentés ci-dessous:

  • 75 UI / ml à 108 UI / ml - positif;
  • Moins de 75 UI / ml - résultat négatif, l'agent causal des lésions virales du foie n'a pas été détecté.

Si le résultat du test est positif, on peut parler de la détection d'un pathogène dans le corps de l'hôte, ainsi que de la charge virale associée. Dans ce cas, le patient peut se voir prescrire un traitement spécifique. Le plus efficace est la thérapie utilisant des agents antiviraux innovants. Cependant, le VHB n'est actuellement reconnu que partiellement curable..

Une PCR négative indique l'absence d'infection par l'agent causal du virus de l'hépatite B. Cependant, cela ne signifie pas que la personne est en parfaite santé. Il est également recommandé d'être testé pour d'autres types d'hépatite. L'hépatovirus de type C est particulièrement insidieux, ce qui provoque le plus souvent une forme chronique de la maladie sans symptômes prononcés. Par conséquent, il est important de diagnostiquer la maladie en temps opportun..

Analyse PCR qualitative

L'analyse PCR qualitative pour l'hépatite B vise à détecter le pathogène. C'est l'une des méthodes les plus précises pour diagnostiquer l'hépatovirus. La réaction en chaîne de la polymérase basée sur les échantillons de sang veineux du patient est réalisée en temps réel.

Un indicateur supérieur à 75,0 UI par ml indique la présence d'un agent causal dans le corps du patient. Cela peut être à la fois porteur du virus et phase active d'une maladie dangereuse..

Quand la PCR est-elle indiquée??

La méthode PCR pour l'hépatite B est la méthode la plus recommandée par les hépatologues pour vérifier la présence du virus dans le sang. Il est recommandé de subir un test de réaction en chaîne par polymérase dans les cas suivants:

  • En présence de symptômes évidents d'hépatite - nausées, vomissements, jaunissement de la sclérotique et de la peau, douleur dans le foie, décoloration des matières fécales et assombrissement de l'urine;
  • Avec la toxicomanie intraveineuse (injection);
  • Avec des indications élevées d'ALT et d'AST dans les résultats d'un test sanguin biochimique;
  • Avec cholestase (stagnation dans les voies biliaires);
  • Grossesse ou chirurgie, préparation à l'accouchement ou chirurgie;
  • Avec des procédures de dialyse ou de transfusion sanguine régulières;
  • Si vous avez eu des relations sexuelles avec un partenaire potentiellement infecté.

Une analyse quantitative ou qualitative de la PCR peut également être prescrite aux personnes qui ont déjà eu une des formes d'hépatite dans le passé. Ainsi, l'état du patient est surveillé, car une rechute est possible..

Comment préparer?

Tout diagnostic de maladie virale nécessite une préparation, sinon les résultats seront inexacts. Avant de donner du sang pour une PCR quantitative pour l'hépatite B, le patient doit:

  • Refusez les aliments lourds et riches en graisses la veille de la prise de sang;
  • Ne mangez pas dans les 8 dernières heures avant de passer le test;
  • Refuser de consommer de l'alcool et des produits du tabac au moins 1 jour à l'avance;
  • Évitez le stress et la surcharge physique, passez une bonne nuit de sommeil.

La collecte d'échantillons de fluide biologique pour la recherche est effectuée le matin. Le plus souvent, l'analyse PCR de l'hépatite B est effectuée à 8 heures du matin.

Analyse PCR pour l'hépatite B

Le virus contenant de l'ADN de la famille des Hepadnaviridae est un agent causal direct de l'hépatite B. L'analyse par PCR de l'hépatite B vous permet de déterminer la présence d'un virus à ADN dans le sang du patient. Un test ADN du VHB positif indique la présence d'une infection dans le sang du patient. Il est à noter que le diagnostic par l'utilisation de l'analyse PCR permet non seulement de déterminer la présence d'une infection, mais également sa charge quantitative et son activité. Cette méthode est fiable, précise et reproductible. La quantification de l'ADN du VHB par qPCR peut être utilisée pour surveiller l'efficacité du traitement contre le VHB et aider à comprendre l'histoire naturelle du VHB.

Le processus d'infection par l'hépatite B se produit par contact domestique ou sexuel, ou par contact direct avec du sang contaminé. Après l'infection, le virus pénètre dans les cellules hépatiques, dans lesquelles il poursuit sa reproduction active. Dans la circulation sanguine, les cellules pathogènes se propagent dans tout le corps. Il est à noter que le virus de l'hépatite B est très résistant à l'acide et aux températures élevées. Il est capable de conserver ses propriétés dommageables pendant six mois..

Types de PCR pour l'hépatite B

À ce jour, deux types de diagnostics sont prescrits si vous suspectez la présence du virus de l'hépatite B: la PCR qualitative (vous permet de déterminer avec une précision de cent pour cent la présence du virus dans le sang) et la PCR quantitative (vous permet de déterminer le degré d'activité du virus).

  • Types de PCR pour l'hépatite B
  • Décodage de l'analyse quantitative
  • Préparation de l'enquête
  • Résumer

Une PCR de haute qualité est prescrite en cas de suspicion d'infection par le VHB ou si d'autres méthodes de diagnostic n'ont pas donné de résultat clair. Ce type d'analyse PCR est extrêmement simple à déchiffrer: négatif (aucun virus n'a été détecté dans le sang), positif (un virus a été détecté dans le sang). La tâche principale de l'analyse qualitative est de déterminer la présence de cellules infectées aux premiers stades de la maladie. Si le virus a été diagnostiqué deux semaines après l'infection suspectée, l'efficacité du traitement sera d'un ordre de grandeur plus élevée. Si le virus reste dans le sang pendant environ deux mois, la maladie devient chronique et ne peut donc pas être complètement guérie..

Si un diagnostic qualitatif a confirmé la présence du VHB dans le sang, le médecin prescrit une analyse quantitative.

L'analyse quantitative vous permet de déterminer l'activité du développement du virus dans le corps du patient. Ce type d'analyse PCR est attribué:

  • pour déterminer le stade de la maladie;
  • surveiller l'efficacité de la thérapie utilisée;
  • pour déterminer le niveau de résistance du virus à un médicament particulier;
  • pour la sélection des médicaments.

Les indicateurs quantitatifs du virus dans le sang sont mesurés en UI par millilitre ou en ADN par millilitre.

Si le médecin prescrit immédiatement un diagnostic quantitatif sans vérifier le diagnostic qualitatif, alors 75 UI par millilitre sont considérés comme la norme. Si moins d'unités internationales sont trouvées, le résultat - le VHB n'est pas détecté, lorsque les valeurs dépassent la norme, la présence d'une hépatite virale B est diagnostiquée.

Décodage de l'analyse quantitative

Les indicateurs suivants (en copies / millilitre) sont considérés comme la norme de l'OCP dans l'hépatite B: moins de 10 3 - le virus est inactif; de 10 4 à 10 5 - le virus est généralement inactif; 10 6 - virus actif; 10 7 - virus à un stade d'activité élevé.

Sur la base d'indicateurs quantitatifs, il est possible de déterminer avec une précision absolue la forme de la maladie (portage, aiguë ou chronique), la réponse du virus au traitement, la nécessité de diagnostics complémentaires.

L'hépatite B chronique est établie lorsque l'activité virale est de 10 5 copies par millilitre. Le transport est diagnostiqué si les indicateurs quantitatifs sont inférieurs à 10 5 copies par millilitre.

Pendant la période de traitement, il est nécessaire de subir des diagnostics quantitatifs répétés sur une base régulière (une fois tous les trois mois) afin de déterminer à temps le moment où le virus développera une immunité aux médicaments utilisés et changera de méthode. Si toutes les études sont effectuées correctement et qu'un traitement efficace est sélectionné, une analyse répétée (après trois jours de traitement) montrera une diminution de l'activité des cellules pathogènes d'au moins quatre-vingt-cinq pour cent.

Une biopsie hépatique est effectuée lorsque, après six mois de traitement, les valeurs d'ALT sont deux fois la norme et que le diagnostic par PCR montre des valeurs inférieures à 105 copies par millilitre de sang.

Préparation de l'enquête

L'analyse nécessite du sang veineux. Afin d'obtenir les résultats les plus précis, vous devez vous préparer à la procédure: refusez de prendre de la nourriture au moins huit heures avant le prélèvement sanguin; abandonner le traitement médicamenteux dans deux jours (il est obligatoire d'avertir le médecin de la prise de médicaments); avant de donner du sang, vous devez passer vingt minutes en mode repos; abandonner le sport, l'alcool, le tabac et les aliments gras douze heures avant l'intervention.

Important: si des diagnostics sont nécessaires pour un enfant de moins de cinq mois, il doit donner une cuillère à soupe d'eau bouillie toutes les dix minutes soixante minutes avant la procédure de prélèvement sanguin.

Résumer

L'analyse PCR de l'hépatite B est aujourd'hui la méthode la plus précise pour diagnostiquer le virus. La méthode vous permet d'identifier les formes mutées et latentes de la maladie, de diagnostiquer la maladie dans les premiers jours de l'infection et, par conséquent, de choisir le traitement le plus efficace. L'assistant de laboratoire compare les résultats de l'analyse avec la norme, puis les entre dans la conclusion. Les données sont traitées en quelques jours. Afin d'obtenir une référence pour une analyse PCR, vous devez contacter un hépatologue, un spécialiste des maladies infectieuses ou un virologue. Il est important de se rappeler que plus tôt vous vous adresserez au médecin, plus rapidement les résultats seront obtenus, par conséquent, plus le traitement sera efficace..

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Spécialité: infectiologue, gastro-entérologue, pneumologue.

Expérience totale: 35 ans.

Formation: 1975-1982, 1MMI, san-gig, diplôme supérieur, médecin spécialiste des maladies infectieuses.

Diplôme scientifique: docteur de la catégorie la plus élevée, candidat en sciences médicales.

Entraînement:

  1. Maladies infectieuses.
  2. Maladies parasitaires.
  3. Urgences.
  4. VIH.

Diagnostics PCR pour l'hépatite: comment déchiffrer, tableau

Analyse PCR pour l'hépatite - qu'est-ce que c'est et pourquoi est-ce fait

L'essence de l'analyse PCR est qu'une partie du gène à l'étude est forcée de se multiplier dans un tube à essai en utilisant des enzymes et des conditions spéciales. L'analyse PCR des virus de l'hépatite permet de déterminer la souche virale, sans laquelle il est impossible de réaliser un traitement efficace: chaque génotype est différemment sensible aux antiviraux.

Deux types de PCR sont utilisés:

  • qualitatif;
  • quantitatif.

La thérapie antivirale nécessite une surveillance constante afin d'ajuster le traitement en temps opportun; à ces fins, la réaction en chaîne par polymérase est également utilisée.

PCR qualitative et quantitative

La PCR qualitative pour l'hépatite donne la réponse: existe-t-il une souche virale dans le sang du patient et laquelle. Le génotypage est nécessaire pour clarifier le diagnostic, le pronostic de la maladie et déterminer le moment du traitement.

Lorsque la présence du virus est confirmée, une PCR quantitative pour l'hépatite est effectuée, à l'aide de laquelle le nombre de molécules d'ARN dans l'échantillon de laboratoire du patient est calculé.

Préparation à l'analyse PCR pour l'hépatite

Pour l'analyse par la méthode de réaction polymérase, du sang veineux est nécessaire. Cela doit être fait le matin à jeun..

Le patient doit se préparer correctement pour l'étude:

  • Pendant 10 heures pour refuser la nourriture, vous ne pouvez boire que de l'eau propre.
  • Arrêtez de boire de l'alcool la veille, ne fumez pas pendant 4 heures.
  • Le stress physique et émotionnel doit être évité avant l'examen..
  • Pendant 2 jours pour arrêter de prendre des médicaments, si cela n'est pas possible, il est nécessaire d'avertir l'assistant de laboratoire. Certains médicaments affectent le résultat final.

Analyse PCR pour l'hépatite C

Si le test PCR pour l'hépatite C donne un résultat positif, cela indique que le microorganisme pathogène se divise et infecte continuellement les cellules hépatiques.

La PCR quantitative ultérieure pour l'hépatite C est mesurée en unités internationales par 1 ml ou UI / ml, ce qui signifie combien de copies d'acide ribonucléique d'une certaine souche du virus C se trouvent dans 1 ml de sang de test.

Le tableau ci-dessous montre le décodage d'une étude quantitative de l'hépatite C par PCR:

Charge virale, copies / mlÉvaluation de la chargeLa nature de la réplication du pathogène
103 et moinsTrès lentInactif
104 - 105FaiblePlus souvent inactif
106Modéreractif
107GrosTrès actif
  1. Une charge virale faible indique que le traitement thérapeutique est correctement sélectionné et que le pronostic de guérison de l'hépatite C est favorable.
  2. Une concentration élevée de cellules virales indique que la maladie est en phase aiguë. Le sang du patient est une source dangereuse d'infection.
  3. La charge virale, dont les indicateurs sont à un niveau moyen, caractérise soit le stade chronique du HVS, soit elle peut avoir deux tendances de développement: vers son augmentation ou sa diminution.

L'analyse PCR quantitative de l'hépatite C est réalisée tout au long de la thérapie antivirale: après 4, 12 et 24 semaines, dont le but est de réduire la charge virale.

À la fin - après 6 mois, une PCR de contrôle est effectuée.

Analyse PCR pour l'hépatite B

Une analyse PCR pour l'hépatite B (B) est effectuée pour détecter une infection (ADN du VHB).

La concentration d'ADN du VHB est mesurée en copies / ml ou me / ml. Pour évaluer les résultats de l'étude, ils sont guidés par les indicateurs suivants:

  • 2x10 ^ 6 - dans quatre-vingt-quinze pour cent des cas deviendront chroniques.

Décodage de l'analyse PCR pour l'hépatite

L'analyse PCR qualitative a deux réponses:

  1. négatif;
  2. positif.

PCR négatif signifie qu'aucun agent pathogène n'a été trouvé dans les échantillons de sang.

La probabilité de fiabilité du résultat est de 95%. Les 5% restants sont une erreur humaine. Cette possibilité est autorisée en raison des exigences élevées de l'étude:

  • règles de stockage des réactifs;
  • qualifications appropriées du personnel médical;
  • pureté du biomatériau.

Le kit PCR lui-même a une précision de diagnostic de 100%.

La PCR quantitative pour l'hépatite vous permet de déterminer la charge virale sur le corps du patient. Avec son aide:

  • le stade de la maladie est spécifié (aigu, chronique);
  • l'efficacité du traitement antiviral est déterminée;
  • la nécessité d'une biopsie hépatique est déterminée.

Dans certains cas, le patient ne ressent aucun signe de maladie, alors que la méthode PCR a établi une infection. Cela signifie que la maladie est à un stade précoce de développement ou sous une forme chronique. Pour clarifier le diagnostic, des études complémentaires sont nécessaires, pour le démarrage précoce du traitement antiviral.

Coût des diagnostics PCR

Les cliniques gouvernementales effectuent gratuitement un test sanguin pour la PCR en cas de recommandation d'un spécialiste des maladies infectieuses ou d'un hépatologue.

Des services payants pour les diagnostics PCR sont fournis dans toutes les grandes villes russes. Le coût dépend du type de test, de l'équipement disponible, du calendrier et d'autres facteurs.

  • Une analyse PCR de haute qualité à Moscou et à Saint-Pétersbourg coûtera de 600 à 900 roubles. Dans les régions - de 300 à 800 roubles.
  • La détermination de la charge virale de l'hépatite C coûtera 17 000 à 22 000 roubles. Pour l'hépatite B (B), le prix d'une étude quantitative: 1200-10000 roubles.

Avantages et inconvénients de la méthode PCR

Quels sont les avantages de la méthode de réaction en chaîne par polymérase par rapport aux autres méthodes de diagnostic?

  1. Large gamme d'applications. Avec la PCR, en utilisant un équipement standard, vous pouvez identifier n'importe quel virus.
  2. La précision de la détermination du pathogène. En utilisant diverses combinaisons d'enzymes et techniques de dosage, une spécification de test à 100% pour l'infection désignée est obtenue.
  3. Haute sensibilité. La technique vous permet de détecter la présence d'une molécule virale dans le sang.
  4. Efficacité. Une analyse qualitative est prête en quelques heures, une analyse quantitative en deux jours.
  5. Diagnostic du virus pendant la période d'incubation. Avec la PCR, le pathogène est déterminé non pas par la présence d'anticorps, lorsqu'il y a déjà une réponse immunitaire du corps, mais avant le début du processus pathologique, ce qui facilite le traitement.

Les inconvénients de l'analyse PCR sont une conséquence de ses avantages:

  • pour la pureté de l'analyse, le degré de pureté le plus élevé est requis, y compris l'air du laboratoire, afin que l'ADN "étranger" ne pénètre pas dans l'échantillon étudié;
  • exigences élevées pour le personnel effectuant l'échantillonnage et l'analyse des biomatériaux.

L'évaluation des résultats obtenus doit être faite par le médecin traitant, qui sait distinguer la vraie analyse du faux positif (lorsque le traitement est déjà terminé, mais qu'un virus non viable reste dans le sang) et du faux négatif (lorsque le virus n'est pas détecté dans le tableau clinique).

Analyse de l'hépatite B: étude PCR

Les progrès de la médecine sont incroyables - de nombreux types de diagnostics n'étaient pas disponibles il y a même un demi-siècle. Alors que maintenant, grâce à eux, même les maladies latentes peuvent être déterminées - par exemple, l'analyse PCR pour l'hépatite B de l'évolution latente. En effet, avec la détection précoce de la pathologie, il est plus facile de la gérer.

Essence de méthode

En soi, la réaction en chaîne par polymérase est une sorte de copie d'une section spécifique d'ADN à l'aide d'un ensemble d'enzymes spécifiques. Si dans l'échantillon présenté de matériel biologique - en règle générale, il s'agit de sang humain, il y a des résidus de particules virales de l'hépatite B, ils peuvent être détectés dans des conditions de laboratoire - en utilisant la méthode de diagnostic PCR développée par des scientifiques.

Vous pouvez voir la réaction à l'aide d'un ensemble standard:

  • ADN de matrice - dans lequel il y a une zone de copie;
  • Régions d'ADN de structure similaire - amorces;
  • une enzyme capable d'activer la réaction - la polymérase;
  • solution de réaction de laboratoire.

Deux variantes de recherche sur l'hépatite B ont été développées - non seulement qualitatives, mais aussi quantitatives. Cela augmente la fiabilité du résultat - vous pouvez identifier les souches mutantes de l'agent infectieux. Par conséquent, la méthode PCR est reconnue dans la plupart des pays du monde comme la «norme d'or» du diagnostic. Il permet aux médecins de donner une conclusion sans ambiguïté - une personne a une maladie virale hépatite B, même avec son évolution latente, ou elle est en parfaite santé.

Variante PCR qualitative

L'objectif principal de l'étude est de déterminer la présence ou l'absence de particules virales de l'hépatite B. dans un échantillon de matériel biologique. Un examen PCR de haute qualité sera recommandé aux personnes pour les indications suivantes:

  • infection suspectée d'hépatite B;
  • la période précoce de l'évolution de la maladie - avant la formation de la réponse immunitaire de l'organisme d'une personne infectée;
  • résultat douteux d'autres méthodes de diagnostic - par exemple, test sanguin sérologique.

L'efficacité d'une telle procédure de diagnostic a été prouvée de manière convaincante même au début de la période d'infection chez l'homme - dans les 1 à 2 semaines suivant une éventuelle infection. La thérapie complexe, que le médecin sélectionne en tenant compte des résultats des analyses de laboratoire pour l'hépatite, augmente les chances des patients d'un rétablissement complet.

Variante PCR quantitative

En plus des études PCR qualitatives, il est important de connaître le paramètre quantitatif de l'hépatite B - la charge virale sur le corps humain. Cela permet au médecin de sélectionner plus facilement le schéma de traitement optimal pour l'infection. La PCR quantitative sera recommandée dans les cas suivants:

  • avant la nomination d'un traitement antiviral - une estimation globale de la charge virale;
  • vérifier l'efficacité du traitement complexe en cours - si le nombre d'agents viraux dans la circulation sanguine diminue;
  • la nécessité de déterminer la résistance des micro-organismes aux médicaments prescrits par un médecin;
  • diagnostic précoce de la progression continue de l'infection, aggravation de la gravité de la maladie.

Décodage PCR

Dans la plupart des cas, les experts recommandent la conduite simultanée d'un examen qualitatif et quantitatif par PCR. Cela vous permet d'obtenir le résultat le plus informatif des diagnostics de laboratoire de l'hépatite B.Valeurs standard de la charge virale:

  • moins de 10x3 - les micro-organismes infectieux sont inactifs, des traces de leur présence ont été identifiées (jusqu'à 200 copies / ml);
  • de 10x4 à 10x5 - la charge du virus sur le corps est minime;
  • à partir de 10x6 - le virus est actif, mais crée une charge moyenne sur le tissu hépatique;
  • de 10x7 - l'infection a un tableau clinique détaillé avec une activité virale élevée.

Si le résultat de la PCR est positif, c'est par le paramètre quantitatif de l'analyse que le spécialiste conclura à quel stade de l'évolution la maladie est:

  • portage de l'hépatite B;
  • infection chronique - l'infection s'est produite il y a plus de 3 à 6 mois;
  • période aiguë de la maladie - jusqu'à 1-1,5 mois à compter du moment de la pénétration des particules virales dans la circulation sanguine.

Si le résultat de la PCR de l'étude est négatif, il peut également y avoir deux conclusions: il n'y a pas d'infection dans le corps et il n'y en a pas, ou la personne s'est complètement rétablie, par exemple après un traitement antiviral complet en temps opportun.

Qui doit subir une PCR pour l'hépatite B

Les médecins ne recommanderont pas à toutes les personnes un tel examen du corps comme un don de sang pour la détection par PCR de l'hépatite B.Comme toute autre procédure médicale, la détermination de la charge virale a ses propres indications:

  • l'intervention chirurgicale est en avance;
  • une transfusion de sang et de ses composants est nécessaire;
  • une grossesse est planifiée ou a déjà été diagnostiquée;
  • la nécessité de nettoyer constamment le sang des produits de désintégration / toxines - avec une insuffisance rénale grave;
  • état d'immunodéficience - exclusion des complications secondaires;
  • contact fréquent avec du matériel biologique - professionnels de la santé;
  • sélection du schéma thérapeutique optimal pour les maladies du foie;
  • évaluation de l'efficacité du traitement antiviral pratiqué contre l'hépatite B.

Préparation à la PCR

Pour obtenir le résultat le plus fiable - y a-t-il vraiment une hépatite B dans le corps humain, il est nécessaire de se préparer avant d'effectuer une étude PCR. Lors de la consultation de la personne examinée, le spécialiste recommandera de respecter les règles suivantes:

  • ajuster le régime alimentaire - une semaine avant de visiter le laboratoire, refuser les plats gras, frits, fumés et épicés, il est préférable d'inclure plus de légumes frais avec des fruits, des soupes et des céréales dans le menu;
  • 2-3 jours avant l'examen, évitez les efforts physiques excessifs, le stress et évitez également de boire des boissons alcoolisées;
  • assurez-vous d'avertir le médecin traitant des interventions chirurgicales antérieures, des maladies virales ou infectieuses avec lésions hépatiques, des médicaments constamment pris;
  • à la veille de l'étude, essayez de vous reposer, ne soyez pas nerveux.

Le matin du jour du test PCR pour détecter l'hépatite B, vous devez vous présenter au laboratoire avec un formulaire de référence d'un médecin, à jeun, si vous fumez, ne fumez pas pendant environ 30 à 40 minutes. L'assistant de laboratoire prélèvera la quantité de sang requise dans une veine et donnera un échantillon biologique pour analyse. Une personne reçoit une opinion littéralement le lendemain - en personne. Il doit être montré au médecin traitant afin que le diagnostic correct puisse être posé..

Possibilité de conclusion erronée

Bien entendu, la procédure de mise en œuvre de la réaction en chaîne par polymérase peut être effectuée avec un certain nombre de violations qui affecteront la précision du résultat obtenu. L'influence est exercée à la fois par des facteurs internes - préparation de mauvaise qualité de la personne examinée et des influences externes - chutes de température, humidité dans le laboratoire, contamination du matériel biologique.

Un résultat faux positif se produit chez les femmes pendant la période de naissance d'un bébé - en raison d'une perturbation hormonale dans le corps. Dans ce cas, elle subira d'autres tests diagnostiques pour exclure le portage de l'hépatite B.

Des erreurs dans les études PCR sont également possibles - au cours d'infections respiratoires aiguës, lors de la prise de certains sous-groupes de médicaments, en raison d'une infection par l'herpès, une infection à cytomégalovirus. Moins souvent, le manque de professionnalisme de l'assistant de laboratoire a un impact - contamination de l'échantillon de sang s'il est manipulé sans gants ou avec des instruments mal traités.

Par conséquent, faire confiance à la méthode PCR pour détecter l'hépatite B est préférable à un laboratoire qui fait face avec succès à de telles études depuis de nombreuses décennies, les employés sont certifiés et hautement professionnels..